白喉诊断标准及处理原则，病例分析，治疗方法参考请浏览相关页面，不要轻易认为萎缩性鼻炎的危害仅仅只是累及鼻子，那是因为你还没了解到萎缩性鼻炎并发症带来的痛苦，下面就让我们一起看看萎缩性鼻炎的并发症有什么吧。萎缩性鼻炎并发症有变态反应性鼻窦炎，因鼻窦粘膜与鼻粘膜相连，易波及鼻窦粘膜则产生变态反应性鼻窦炎。主要表现为头痛、头晕。如继发感染，可出现脓涕，但症状加重。支气管哮喘可与变性鼻炎同时存在。一些哮喘患者患者常在喷嚏发作后发病。鼻变态反应可借且咽鼓管波及中耳。鼻，......彻底，容易向如下几方面发展：经鼻窦开口向鼻窦蔓延形成鼻窦炎;经咽管向中耳蔓延形成中耳炎;向咽喉和支气管扩散形成急性咽炎，急性喉炎、急性气管炎和支气管炎(婴幼儿还常引起肺炎);经鼻泪管蔓延形成结膜炎、泪囊炎。耳鼻喉医生温馨提示广大患者朋友：对于急性鼻炎一定要加以重视，不要认为是感冒就可以放松心态，很多鼻部的疾病都是由于急性鼻炎而引起的，所以一定要以预防为主、防治结合，早期加以治疗，避免引发其他疾病。

血清学诊断方法

C1 间接血凝法测定白喉抗体

C1.1 原理

间接血凝法是利用红血球作为载体，并经过一定处理后，使蛋白质抗原吸附于红血球表面，此种血球称为致敏血球。然后用致敏血球来测定相应的微量抗体。当特异抗体存在时，发生抗原抗体结合，血球就出现凝集，为阳性反应。

C1.2 材料

C1.2.1 抗原

作致敏血球用。白喉类毒素含量为20～30Lf/mL以上。

C1.2.2 标准抗毒素

每毫升含10个国际单位，用以测定致敏血球效价，用前须进行56℃，30min灭活。

C1.2.3 血球

健康绵羊血球（血球保存液保存）。

C1.2.4 试验溶液配制

C1.2.4.1 0.15mol/L磷酸盐和食盐溶液配制

C1.2.4.1.1 0.15mol/L Na2HPO4

Na2HPO4·12H2O（M·W＝358.16） 53.72g

蒸馏水至 1000mL

C1.2.4.1.2 0.15mol/LKH2PO4

KH2PO4（M·W＝136.09） 20.41g

蒸馏水至 1000mL

C1.2.4.1.3 0.15mol/LNaCl

NaC1（M.W＝58.45） 8.77g

蒸馏水至 1000mL

C1.2.4.2 pH7.2磷酸盐缓冲液（P.B.S）

0.15mol/LNa2HPO4286mL

0.15mol/LKH2PO4 90mL

0.15mol/LNaCl 376mL

配后测pH值，灭菌后备用。

C1.2.4.3 pH6.4磷酸盐缓冲液（P.B.S）

0.15mol/LNa2HPO4 100mL

0.15mol/LKH2PO4 210mL

0.15mol/LNaCl 310mL

配后测pH值，灭菌后备用。

C1.2.4.4 pH8.2磷酸盐缓冲液（P.B.S）

0.15mol/LNa2HPO497mL

0.15mol/LKH2PO4 3mL

配后测pH值，灭菌后备用。

C1.2.4.5 戊二醛稀释液

pH8.2磷酸盐缓冲液（P.B.S） 100mL

0.15mol/LNaCl 900mL

蒸馏水 500mL

灭菌后放冷库备用。

C1.2.4.6 1％戊二醛溶液

25％戊二醛溶液 4mL

戊二醛稀释液 96mL

C1.2.4.7 1％鞣酸溶液

鞣酸 1g

蒸馏水加至 100mL

4℃避光保存可用一周，用前以生理盐水稀释至1∶20000。

C1.2.4.8 血球保存液

葡萄糖 2.05g

枸橼酸钠 0.8g

NaCl 0.42g

蒸馏水加至 100mL

测pH，需用10％枸橼酸校正至pH6.15，于0.7kPa消毒20min。

C1.3 致敏血球制备

C1.3.1 血球采集与处理

选择健康绵羊静脉采血，注入血球保存液中（血球与保存液比例为1∶1），摇匀放冷库（2～8℃）48h，离心弃上清，用生理盐水洗涤血球三次，每次离心（2000～2500r/min）20～25min，弃上清得压积血球。

C1.3.2 血球醛化

取上述压积血球1份，加入24份冷却的1％戊二醛溶液中，放2～6℃，固定时间大于等于30min，每5～6min摇动一次，离心（2000r/min，10min）弃上清，用生理盐水洗五次，再用蒸馏水洗五次，最后用生理盐水配成10％血球悬液，加入1∶10000硫柳汞防腐，放2～8℃冷库备用。

C1.3.3 血球致敏

10％醛化血球悬液，白类用pH7.2磷酸盐缓冲液（P.B.S）稀释至2.5％后进行鞣酸处理。

a）鞣酸处理

2.5％血球一份加1∶10000的鞣酸一份，混匀后放45℃或37℃水浴30min（每5～6min摇一次），然后用pH7.2磷酸盐缓冲液（P.B.S）洗涤三次（2000～2500r/min，5～6min），最后用pH6.4磷酸盐缓冲液（P.B.S）配成2.5％鞣化血球悬液。

b）致敏

2.5％鞣化血球一份加精制白喉类毒素一份（25Lf/mL）加pH6.4磷酸盐缓冲液（P.B.S）三份置45℃或37℃水浴30min（须经常摇动），离心弃上清，用0.5％兔血清生理盐水洗涤二次，再用0.5％兔血清生理盐水配成2.5％血球悬液。

C1.3.4 对照血球制备

2.5％鞣化血球一份加4份pH6.4磷酸盐缓冲液（P.B.S）置45℃或37℃水浴30min（须经常摇动），离心弃上清，用0.5％兔血清生理盐水洗涤血球二次，再用兔血清生理盐水配成2.5％对照血球悬液。

C1.4 效价滴定

C1.4.1 致敏血球、敏感度的测定

将标准白喉抗毒素用0.5％兔血清生理盐水先行稀释使每毫升含1个单位，然后再以倍比法进行一系列稀释，自1∶2～1∶4096，每个稀释度取一滴（0.025mL）加入血凝板孔中，再加入致敏血球一滴（0.025mL），摇匀放37℃2h，取出判读结果或放冰箱，次晨判读结果，以"＋＋"为凝集试验终点。白喉类毒素致敏血球的敏感度不能低于0.003 906 IU/mL.同时作两种对照：

a）不同稀释度抗血清加鞣化血球，以检查抗血清有无非特异性凝集；

b）0.5％兔血清生理盐水加致敏血球以检查血球有否自凝作用。以上两种对照皆为阴性试验才能成立，否则应重试。

C1.4.2 待检血清处理

a）经56℃30min灭活。

b）醛化血球吸收。吸收方法：待检血清1份加50％醛化血球2份，放37℃ 1～2h，离心沉淀，吸取上清即为1∶2稀释的血清样品。

C1.4.3 待检血清滴定

先在血凝板中每孔加入0.5％兔血清生理盐水一滴（0.025mL），再将待检血清用微量滴管滴入第一孔中（0.025mL），使与0.5％兔血清生理盐水混合，注意不要发生气泡，怎样治疗白喉诊断标准及处理原则立性的疾病，而是整个鼻-鼻窦病变的一部分，无论中隔偏曲与各种鼻-鼻窦病变关系如何，在实施各种鼻内镜手术的同时，对包括中隔偏曲在内的鼻-鼻窦多架构解剖异常，进行“全面协调考虑，同期完善处理”。功能性鼻内窥镜手术是国内近年来逐渐开展起来治疗鼻中隔偏曲的新技术，与传统的中隔矫正手术相比，鼻内窥镜下行鼻中隔手术照明好，术野清晰，在直视下手术，易剥离粘连处和及时发现粘膜损伤，术后并发症少;特别是行局限性鼻中隔切除术和同期完成鼻窦手术时更显示了它的优越性。随着鼻内窥镜技术的普及和鼻中隔偏曲对鼻窦引流影响的深入研究，鼻中隔手术的适应证在扩大，鼻内窥镜下行鼻中隔成形术有取代传统手术的趋势。 混匀血清后，每孔均取0.025mL，加入到第二孔中。混匀后自第二孔中吸出0.025mL到第三孔中，如此类推，最后一孔取出0.025mL弃掉。或用0.025mL的稀释棒自第2孔开始作系列稀释。用微量滴管吸取0.025mL0.5％致敏血球加到每个孔中，加时滴管勿碰到孔壁，以免沾有抗血清。然后摇匀，放37℃ 2h取出，放2～10℃冰箱内次日晨判读结果，以“＋＋”为凝集试验终点。每份待检血清可做三个稀释度抗血清加鞣酸血球的对照，稀释方法如前所述（即1∶2，1∶4，1∶8），以排除血清中非特异凝集。

C1.4.4 结果计算

待检血清单位＝待检血清终点稀释度×标准血清终点稀释度所含单位数。例如标准白喉抗毒素（10 IU/mL）终点稀释度为1∶2048，含有0.004 8 IU/mL，而待检血清终点稀释度为1∶8，于是其单位为0.038 IU/mL。

C1.4.5 结果判定标准

a）凝集的红血球均匀地铺在孔底形成一薄层为“＋＋＋＋”；

b）凝集的红血球基本同a），只是在此薄层的底部有一很弱红圈为“＋＋＋”；

c）凝集的红血球在孔底形成的薄层，同时中间可见一松散的红圈为“＋＋”；

d）凝集的红血球在孔底形成一圆圈，周围可见少量的红血球比对照圆圈稍大为“＋”；

e）血球在孔底形成紧密的圆圈成圆点为"－".影响血凝试验的准确性与敏感度因素很多，如用具的清洁，材料的标准化，操作的细致等。

C2 酶联免疫吸附试验检测白喉毒素抗体

C2.1 原理

利用包被在固相载体上白喉类毒素捕捉待检血清中相应抗毒素抗体，再用酶标记的抗人IgG抗体去掉反应（抗原－抗体－酶标记抗抗体），利用底物使酶显色而测知是否存在抗体。

C2.2 材料

C2.2.1 抗原

精制白喉类毒素1110Lf/mL。

C2.2.2 结合物

羊抗人IgG酶标记抗体。

C2.2.3 载体

1cm×4cm聚苯乙烯塑料管平底带盖。

C2.2.4 底物

邻苯二胺。

C2.2.5 参考血清

多份间接血凝法阳性高效价血清混合为阳性参考血清，多份阴性血清混合为阴性参考血清。

C2.2.6 被检血清

白喉暴发流行区的病人和健康者。

C2.2.7 测定仪

721型分光光度计。

C2.3 方法及步骤

C2.3.1 包被抗原量及被检血清最适稀释倍数的确定

用阳性及阴性参考血清与抗原作方阵式滴定，确定本试验包被抗原浓度为20μg/mL，被检血清最适起始稀释度为1∶40.

C2.3.2 参考血清标准曲线绘制

阳性及阴性参考血清均从1∶40开始至10240二倍法稀释，反应结果用721型分光光度计测光密度OD值，γ＝492nm.本试验取三次测定结果的均值，以血清稀释度为横坐标，相对应的OD值为纵坐标，画曲线；然后用相关回归法确定OD值与血清稀释倍数相对应的标准曲线。阳性血清最高OD值为0.6，最低为0.1.因阳性和阴性血清呈明显差别的界限OD值为0.3处，故确定OD值大于等于0.3为阳性，其所对应的血清稀释度为1∶2560，即为一个单位。每份被检血清稀释度为1∶40，效价从标准曲线查出。经测算，两系数的P值皆小于0.01。

C2.3.3 抗原包被

每管加已稀释好的抗原1.0mL，放4℃过夜，然后用pH7.2磷酸盐缓冲液（P.B.S）－吐温20洗涤三次，两次之间静止3min，

C2.3.4 加被检血清1.0mL，置室温2h，再洗涤三次，方法同前。

C2.3.5 加结合物（1∶8000）1.0mL，室温2h，洗涤同前。

C2.3.6 加底物液（0.04％）1.0mL，室温下30min，加2mol/L硫酸0.015mL，如终止反应立即测OD值。

C3 固相放射免疫法测白喉抗体

C3.1 基本原理

固相放射免疫分析法（SPRIA）是应用双抗体法，以纯化的白喉类毒素吸附到固相载体上，加入特异性抗血清，载体上形成抗原－抗体复合物。然后再加入标有同位素的第二抗体，就形成抗原－抗体－抗抗体复合物，通过测定标记的第二抗体的放射性就可确定相应抗体的含量。

C3.2 材料和方法

C3.2.1 血清标本来源

人群白喉抗体水平检测对象，多为采集儿童血清标本。

C3.2.2 精制白喉类毒素进一步纯化，经SephadexG－200过滤，测其浓度。

C3.2.3 抗血清（标准品）

C3.2.4 第二抗体及标化法

以马抗人IgG（经纯化）作为第二抗体，参照格林伍德（Gree Wood）和亨特（Hunter）的高比度标化法进行放射碘化标化获得的（上标始）125（上标终）I－马抗人IgG，

C3.2.5 固相载体

U型聚氯乙烯软塑料板。

C3.2.6 缓冲液及填充液

a）缓冲液：PBST，即含0.05％吐温20的0.01mol/LpH7.4磷酸缓冲盐水。

b）稀释液：PBST－BSA，即在缓冲液中加入0.5％的牛血清白蛋白。

c）填充液：PBS－BSA，即在稀释液中减去吐温20。

C3.3 操作方法

C3.3.1 包被抗原，用碳酸缓冲液（pH9.6）将精制白喉类毒素稀释成5μg/mL，加入聚氯乙烯板各孔

100μL，置4℃冰箱过夜。

C3.3.2 将抗原溶液甩净，用PBST洗5次，每1次静置1min左右，每孔加满填充液，将板放入湿盒内，37℃孵育1h，通过水泵将填充液吸净。

C3.3.3 每孔加入用PBST－BSA1∶20稀释的血清标本100μL（做双份），37℃孵育2h，吸掉孔内液体，用PBST洗5次。

C3.3.4 每孔加入20万CPM125I标记的马抗人免疫球蛋白（125I－IgG）100μL，37℃保温2h，吸掉液体后用PBST洗5次，吸净待干。

C3.3.5 用剪刀将聚氯乙烯软塑料板上的各孔剪下来，进行γ放射性测量，每孔计数1min。

C3.3.6 以不同稀释度的标准品所得结果在坐标纸上划出标准曲线，用每份标本双孔的平均值，在标准曲线上查出相应的抗毒素IU/mL。

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